A colonização portuguesa tinha implicações decisivas para a vida dos povos indíginas. O colonizador não só tomava suas terras como impunha o trabalho forçado e interferia em sua organização social. Os jusuítas, por sua vez, concorriam para acirrar as diferenças ao combater a atuação dos pajés (feiticeiros) e a prática da antropofagia e da poligamia.
Em 1562, os povos nativos do litoral do atual Espírito Santo até São Paulo aliaram-se aos franceses e uniram-se a chamada Confederação dos Tamoios para enfrentar os portugueses. O conflito durou vários anos, com constantes ataques indígenas às vilas. Num desses episódios, o núcleo da atual cidade de São Paulo, no interior do continente, quase foi destruído, e os colonizadores expulsos da região. No final, porém, os índios saíram derrotados. Uma figura importante para apaziguar os ânimos dos revoltosos e pôr fim ao conflito foi o jesuíta José de Anchieta, que se encarregou das negociaçõles de paz com os nativos.
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